سالم الكيجي طبيب المنتدى
عدد المساهمات : 337 تاريخ الميلاد : 17/01/1980 تاريخ التسجيل : 14/10/2011 العمر : 44 نقاط الـــنــشــــاط : 155
| موضوع: طريقة الايزا بالعربي الجمعة نوفمبر 18, 2011 6:37 pm | |
| طريقة الاليزا بالعربي
[center] نتابع معا شرح طرق القياس الكيميائى كما وعدناكم من قبل وهذة المرة نشرح طريق الاليزا ElISA ( Enzyme linked immunsorbent assay) (EIA)[/center]
احدى الطرق التى تستخدم اما لتحديد نسبة انتيجين مجهول فى العينة (الطريقة المباشرة) او تحديد نسبة أجسام مضادة فى العينة ( الطريقة غير المباشرة ) تستخدم بصورة كبيرة فى تحاليل المناعة والهرمونات وكذلك الفيروسات * قبل البدء فى شرح الطريقة يجب تذكر معلومة هامة فى علم المناعة وهى فكرة المناعة المتخصصة والتى تعتمد عليها فكرة هذة الطريقة وهى أنة عند دخول جسم غريب الى جسم الانسان يقوم جهاز المناعة بتكوين أجسام مضادة ضد انتيجينات هذا الجسم الغريب وتظل موجودة فى الجسم فيما يسمى الذاكرة المناعية , تكون هذة الاجسام المضادة خاصة بالانتجين الذى تكونت من أجلة فقط ومن هنا تأتى الفكرة فعنما نريد أن نبحث عن انيجين معين فى عينى نأتى بالاجسام المضادة المتخصصة لة فترتبط بة والعكس صحيح * طريقة الاليزا المباشرة Direct Elisa
فى الاليزا عادة نستخدم أطبافق الاليزا وهو طبق مكون من صفوف وكل صف مكون من 8 ويلات (نقرات) وعاة يكون الطبق 96 ويل [ندعوك للتسجيل في المنتدى أو التعريف بنفسك لمعاينة هذا الرابط]فى الطريقة المباشرة نبحث عن أنتجين مجهول
2- تكون جدران الويلات مغطاة بالاجسام المضادة الخاصة بالانتيجين المراد الكشف عن وجودة 3- عند اضافة العينة الى الويل تقوم الاجسام المضادة الموجودة على جدران الويل بالارتباط بالانتيجن اذا وجد فى العينة 4- يتم غسيل الويل للتخلص من الاجسام المضادة غير المرتبطة والانتيجنات الاخرى الغريبة ويتبقى الانتجين المطلوب مرتبط بالجسم المضاد الوجود على جدار الويل (antibody antigen complex) يسمى الجسم المضادالمرتبط بالانتجين (معقد الانيجين والجسم المضاد [ندعوك للتسجيل في المنتدى أو التعريف بنفسك لمعاينة هذا الرابط]يتم اضافة جسم مضاد أخر يكون مميز او معلم بواسط انزيم يتفاعل هذا الجسم المضاد الثانى مع مع معقد الانتيجين والجسم المضادتكرر عملية الغسيل مرة أخرى للتخلص من الاجسام المضادة غير المرتبطةيتم اضاف الخطوة الاخيرة وهو مركب (substrate or tmb) يقوم الانزيم المرتبط فى الجسم المضاد الثانى بتحويلة من مادة عديمة اللون الى لونStop solutionيتم وضع محلول لوقف التفاعل يسمىيتم القراءة على جهاز قراءة الاليزا عند الطول الموجى المناسبتتناسب قوة امتصاص هذا اللون مع تركيز الانيجين المجهول فى العينة ويأتى مع كل كيت اليزا عدة استاندرات (6 غالبا) بتركيزات متدرجة معلومة يتم عمله مع الاختبار المطلوب ثم يتم رسم منحنى قياسى يمثل concentrationوالتركيز absorbanceالعلاقة بين قوة الامتصاص
ويتم حساب النتائج من هذا المنحنى
[center]* طريقة الاليزاغير المباشرة In Direct Elisa
نفس خطوات الاليزا المباشرة ولكن فى هذة الطريق نبحث عن الاجسام المضادة المجهولة فى العينة فتكون جدران الويلت مغطاة بالانتيجنات الخاصة بالاجسام المضادة المراد الككشف عنها وباقى الخطوات هى نفسها ولعل اشهر الامثلة لهذا النوع الاليزا الخاصة بالكشف عن الاجسام المضادة بفيروس سى [ندعوك للتسجيل في المنتدى أو التعريف بنفسك لمعاينة هذا الرابط]. [ندعوك للتسجيل في المنتدى أو التعريف بنفسك لمعاينة هذا الرابط]
| |
|
حقي الخزرجي الأدارة
عدد المساهمات : 792 تاريخ الميلاد : 03/04/1980 تاريخ التسجيل : 11/10/2011 العمر : 44 الموقع : العراق ديالى قرة تبة نقاط الـــنــشــــاط : 150
| موضوع: رد: طريقة الايزا بالعربي الجمعة نوفمبر 18, 2011 7:18 pm | |
| | |
|
حسين الخفاجي وكيل شبكة العالمية وخبير شيرينج
عدد المساهمات : 230 تاريخ الميلاد : 01/01/1989 تاريخ التسجيل : 22/10/2011 العمر : 35 الموقع : موقعي في عطارد جانب الارض
| موضوع: رد: طريقة الايزا بالعربي الجمعة ديسمبر 09, 2011 10:26 am | |
| | |
|